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流式檢測細(xì)胞周期
貨 號: HS-CR008
產(chǎn)品規(guī)格: /樣
價(jià) 格: ¥ --
周 期: 2周
產(chǎn)品介紹
一、服務(wù)簡介 細(xì)胞周期(Cell Cycle)是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程,細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個(gè)階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時(shí)離開細(xì)胞周期,停止細(xì)胞分裂,執(zhí)行一定生物學(xué)功能(G0期)。 流式細(xì)胞儀的工作原理是將待測細(xì)胞放入樣品管中,在氣體的壓力下進(jìn)入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細(xì)胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,形成細(xì)胞柱。通過對流動液體中排列成單列的細(xì)胞進(jìn)行逐個(gè)檢測,得到該細(xì)胞的光散射和熒光指標(biāo),分析出其體積、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗原等物理及化學(xué)特征。 細(xì)胞內(nèi)的DNA含量隨細(xì)胞周期進(jìn)程發(fā)生周期性變化,如G0/G1期的DNA含量為2C,而G2期的DNA含量是4C。利用PI標(biāo)記的方法,通過流式細(xì)胞儀對細(xì)胞內(nèi)DNA的相對含量進(jìn)行測定,可分析細(xì)胞周期各時(shí)相的百分比。 1、取對數(shù)生長期細(xì)胞,倒去培養(yǎng)液,胰酶適度消化細(xì)胞,用培養(yǎng)液吹打,800 rpm,離心 15 min去上清。 2、PBS洗2次,加0.5 mL PBS吹勻,務(wù)必吹散。 3、用5 mL注射器將細(xì)胞吸起,用力打入5 mL 70%(預(yù)冷)乙醇中,封口膜封口。4℃固定過夜(可長至2周)。 4、800 rpm 15 min收集固定細(xì)胞,PBS洗2次。 5、用0.4 mL PBS重懸細(xì)胞并轉(zhuǎn)至Tube中輕輕吹打(防止細(xì)胞破碎)。 6、加RNase-A約3 μL至終濃度約為50 μg/mL ,37℃水浴消化30 min; 七、加PI約50 μL至終濃度約為65 μg/mL ,在冰浴中避光染色30 min。 八、用300目(孔徑40~50微米)尼龍網(wǎng)過濾,上機(jī)檢測。 九、樣品分析測定及打印。 1、 客戶提供:狀態(tài)良好的受試細(xì)胞; 2、實(shí)驗(yàn)周期:1-2周; 3、明確檢測時(shí)間 4、提供流式原文件 五、詢價(jià)及訂購 感謝您選擇我公司的流式檢測細(xì)胞周期服務(wù)。如有相關(guān)問題請聯(lián)系我們的工作人員。